寄生虫卵检测制片（改良加藤氏法）

卫生部办公厅关于印发《全国土源性线虫病监测方案》的通知

一、背景

土源性线虫（钩虫、蛔虫、鞭虫和蛲虫等）在我国分布广泛，感染人数众多，严重危害人民群众的身体健康，阻碍经济发展和社会进步。年卫生部公布的全国人体重要寄生虫病现状调查结果显示，全国土源性线虫感染率为19.56％，推算感染人数达1.29亿，表明我国土源性线虫感染率仍处于较高水平，这与我国当前构建和谐社会的要求不相适应。为及时掌握我国土源性线虫病的流行动态和流行规律，为制定土源性线虫病防治策略与措施、评价防治效果提供科学依据，有必要在全国范围内有计划、连续、系统地开展土源性线虫病监测。根据《-年全国重点寄生虫病防治规划》，特制订《全国土源性线虫病监测方案》。

二、监测目的

（一）了解土源性线虫病流行动态及影响因素，掌握流行规律，预测流行趋势。

（二）为制订防治对策和评价防治效果提供科学依据。

（三）为国家和地方卫生城市（城镇）创建工作提供相关评价依据。

三、监测病例定义

本方案的监测病例是指在人群中开展土源性线虫病原学检查时，发现钩虫、蛔虫、鞭虫和蛲虫等虫卵或虫体者即为土源性线虫病病例。

四、监测内容

（一）监测点监测

1.确定原则

（1）根据全国土源性线虫感染率分类布点；

（2）监测点人群土源性线虫感染率应相当于所在省、自治区、直辖市人群的平均感染水平；

（3）监测点所在县（市、区）具有一定的工作基础，能够主动配合并承担一定的监测任务。

2.监测点分布

按照分类布点的原则全国共设22个监测点：

（1）感染率大于20％的地区共10个点：海南、贵州、四川、广西、湖南、重庆、福建、湖北、江西、云南；

（2）感染率5％～20％的地区共7个点：安徽、广东、山东、甘肃、青海、河南、江苏；

（3）感染率小于5％的地区共5个点：黑龙江、上海、河北、山西、北京。

3.监测点的确定程序

（1）监测点应固定在一个行政村或若干自然村，总人口数一般不少于人，每次受检人数不少于人。

（2）监测点由省级疾病预防控制中心或寄生虫病防治所选择确定，并报中国疾病预防控制中心备案。

（3）监测点一经确定，原则上5年内不变动。

4.监测内容与方法

（1）人群感染情况监测

①内容：钩虫、蛔虫、鞭虫及蛲虫，检查到其它虫种一并登记。

②对象：年龄在3周岁以上的常住居民。

③方法：每年9～11月份采用改良加藤厚涂片法（一粪三检），3～12周岁儿童加做透明胶纸肛拭法检测蛲虫卵。

④指标：钩虫、蛔虫、鞭虫分别计算感染率和感染度，蛲虫计算感染率。

（2）土壤中人蛔虫卵污染情况监测

①土壤采样点：每个监测点随机抽取10户，每户采集菜园、厕所周边、庭院、厨房四类地点的土样。

②采样量：每户每类地点1份，每份30克。

③检查方法：镜检受精或未受精蛔虫卵，土壤培养法区别死活受精蛔虫卵。

④指标：分别计数人的蛔虫卵、受精蛔虫卵和培养后活受精蛔虫卵。

（3）相关因素调查

调查监测点的地理环境、气温、湿度、降雨、农作物、经济水平、卫生状况、防治措施等自然和社会因素。

（二）城市（城镇）14岁以下儿童蛔虫感染监测

拟申报国家和地方卫生城市（城镇）的地区需进行城市（城镇）14岁以下儿童蛔虫感染监测。其它地区可根据本地寄生虫病防治规划和需求，参照本方案开展监测工作。

1.样本量：总人口数在50万以上的城市，调查人数不少于人；总人口数在50万以下的城市，调查人数不少于人。

2.抽样方法：在城区和郊区各随机抽取2所学校，对14岁以下各年级学生开展蛔虫感染监测，每年级至少调查人。

3.检查内容：蛔虫卵。

4.检查方法：采用改良加藤厚涂片法（一粪三检）检查粪便标本，观察蛔虫感染情况。

5.指标：蛔虫感染率和感染度。

五、数据收集、分析和反馈

（一）监测点数据的收集、分析和反馈

1.中国疾病预防控制中心负责建立并下发统一的监测点调查数据库软件。

2.省级疾病预防控制机构负责监测点数据的收集和录入，并于次年1月15日前将数据库与年度监测报告报中国疾病预防控制中心。

3.中国疾病预防控制中心负责对全国所有监测点数据进行汇总、分析后，于次年3月底前将监测结果反馈各省、自治区、直辖市。

（二）城市（城镇）14岁以下儿童蛔虫感染监测数据的收集

凡开展14岁以下儿童蛔虫感染监测的城市（城镇），由当地疾病预防控制机构负责收集、录入和管理监测资料，并将监测结果报当地卫生行政部门和爱卫会，作为申报国家和地方卫生城市（城镇）的评价依据。

六、质量控制

（一）培训

中国疾病预防控制中心寄生虫病预防控制所负责对承担监测点工作任务的省级业务骨干进行培训。各省、自治区、直辖市负责本地区监测点技术培训。

（二）督导检查

中国疾病预防控制中心负责组织对监测点工作进行督导检查，检查内容包括监测工作计划的完成情况、人员培训及技术规范的落实等。

（三）镜检质量控制

中国疾病预防控制中心寄生虫病预防控制所负责组织对监测点镜检结果进行复检，对每个监测点至少抽检30%的阳性片（如阳性片不足10片则全部检查），假阳性率不得超过10%；阴性片至少抽检5%，假阴性率不得超过10%。中国疾病预防控制中心寄生虫病预防控制所应及时反馈和公布监测点镜检质控结果。

备注：

为了节省各单位时间，便于开展工作，现推荐“广州华南生物工程有限公司"为寄存虫卵检测制片盒（改良加藤氏法）的特定供应商，：。

附：说明书

寄生虫卵检测制片盒使用说明书

（改良加藤氏法）

简介：改良加藤氏法是世界卫生组织（WHO）推荐的检测寄生虫卵方法，可同时检测蛔虫卵、钩虫卵、肝吸虫卵等等。本检测制片盒辅助用于显微镜检测粪便中寄生虫虫卵，可提高寄生虫检测效果并能定量分析感染度。

检测包组成：

1、复合染液1瓶20毫升/瓶

2、定量板片

3、刮片片

4、尼龙网张

5、玻璃纸张（22毫米*30毫米）

6、载璃片片

操作步骤：

1、将尼龙绢片置于待检粪样上，用塑料刮片在其上轻刮，使细粪渣透过尼龙绢孔上，取过滤后的粪便。2、将定量板放在载玻片中部，然后把刮片上的细粪渣填入定量板的圆孔内，使其填满全孔并抹平、小心移走定量板，使粪样留在玻片上。

3、取1张浸泡好的亲水玻璃纸，抖掉多余的透明液，盖在粪样上，用一块较厚的载玻片轻压，使粪便均匀地展开于玻璃纸下。4、将制备好的加藤片放于标本盒内（内垫吸水纸）。

5、编号后置室温25℃、湿度75%时约1小时或30~36℃温箱中约半小时后镜检。

镜检及结果判断：

1、镜检：将透明好的加藤片置光学显微镜的载物台上，在低倍镜（10×）下镜检。镜检仔细检查每一个视野，并特别注意与未受精蛔虫卵的鉴定。计数全片虫卵（计数原则：数上不数下，数左不数右）。

2、加藤片的虫卵计数：以镜检每片检出的虫卵数的24倍数（一粪一检），即为每克粪便虫卵数（EPG）。

计算3张加藤片的血吸虫卵数分别为A、B、C，每克粪便虫卵数（EPG）为：（A+B+C）×8（一粪三检）。

注意事项：

1、每份粪样需做三张涂片（一粪三检，以提高检出率）

2、裁好的玻璃纸要捻开一片片放入透明液中，切忌整叠放入，以免内部浸不透，而影响透明效果；浸泡时间不能少于24小时。

3、对薄壳虫卵，如钩虫卵等的透明时间zui长不能超过2小时，避免因透明过度而漏检。

4、粪便过硬时，加少许清水或透明液浸泡片刻，再行刮取。

5、定量板一定要置于载玻片的中部，如果定量板偏于一侧，则制片后玻片边缘的粪膜不能进入镜检视野内而产生漏检。6.制作标本时，应防止过分干燥，以免虫卵变形或破裂，以致影响虫卵鉴别。7.粪渣透明的速度取决于温、湿度和粪膜的厚度，一般放置室温即可，冬天则需置温箱中以加快透明。如粪膜过厚，则不易寻找虫卵。

本检测制片包于常温保存，24个月内有效。

广州华南生物工程有限公司

规格：人份/包仅供研究，不作临床诊断！